一、流動相溶劑瓶的保養(yǎng)
溶劑瓶是流動相的起點，通常是盛放水相溶液或是有機相溶液。
1.水相溶液
對于水相溶液來說，首要的問題是防止污染。雖然液相用的水大都經(jīng)過殺菌處理，但是細菌的生命力很頑強，在適當?shù)臏囟群凸庹涨闆r下，它們就會活躍起來，如果在流動相里加入磷酸鹽一類的添加劑，它們更是如虎添翼。所以，對于溶劑瓶我們要做的非常重要的工作就是勤換流動相，常換常新。
2.有機相溶液
對于有機相溶液，可以不用擔心細菌繁殖的問題。但是有機相容易發(fā)生聚合，特別是乙腈在適宜的光照條件下極易發(fā)生聚合，瓶子里就會出現(xiàn)一些絮狀的聚合沉淀物。為了防止聚合過程的發(fā)生，裝乙腈時要用棕色的溶劑瓶，避免陽光直射，更換乙腈時應當棄去瓶底剩余的溶液。
3.清洗過濾
溶劑瓶里的過濾頭，其作用是為了防止溶液瓶中的顆粒雜質(zhì)進入到儀器的流路系統(tǒng)中，它的材質(zhì)通常分為玻璃燒結石英和不銹鋼，如果不慎堵塞會造成流動相吸液不暢，因此必須進行清洗，玻璃材質(zhì)的通常是用稀硝酸泡，而不銹鋼材質(zhì)的可以直接進行超聲清洗。
4.流動相的脫氣
脫氣的目的是為了除去流動相中溶解的氣體，使色譜泵的輸液準確，保留時間和色譜峰面積再現(xiàn)性提高;使基線穩(wěn)定，信噪比增加，防止氣泡引起尖峰，從而提高檢測器性能;減少死體積，防止填料氧化，從而保護色譜柱。目前常用的脫氣方法有以下4種。
(1)氦氣脫氣法:利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好，但成本高；
(2)加熱回流法:效果較好，但操作復雜，且有毒性揮發(fā)污染；
(3)真空脫氣法:易抽走有機相；
(4)超聲脫氣法:流動相放在超聲波容器中，用超聲波振蕩10～15min，此方法效果較差，但操作簡單。實際工作中，超聲脫氣法操作簡單，仍被廣泛應用，雖然此方法有時會引起氣體溶解度的增加，但基本上能滿足日常分析操作的要求。
二、高壓泵的保養(yǎng)
泵是液相色譜的核心，泵將流動相從溶劑瓶輸送到液相流路系統(tǒng)中，并要在高壓下保持流量和壓力的穩(wěn)定。狀態(tài)正常的高壓泵是液相色譜準確分析的基礎，所以平日一定要重視對泵的維護。
1.泵壓力波動
很多情況下，泵的問題反映在壓力上，壓力波動又是最常見的一類問題。泵正常的壓力波動通常會在2%以內(nèi)，且平穩(wěn)規(guī)律;不正常的波動通常由氣泡和鹽造成。如果流動相中的氣泡沒有被脫氣機除掉而到了泵以后，就會造成壓力波動，通常我們可以通過重新清洗(purge)流路和再次脫氣流動相加以解決。
由鹽造成的波動主要是因為流動相中加入了濃度較高的緩沖鹽，在含鹽流動相與有機相混合的時候，鹽會有微小的析出，從而導致壓力異常波動，解決這類問題可以考慮適當降低鹽的濃度，或者使用甲醇取代乙腈有機相。如果一定要用到此類流動相，可以考慮在有機相中加入一定比例的水，然后適當提高梯度結束的終點。
2.過濾白頭保養(yǎng)
在泵的維護里還有一項常做的工作就是更換清洗閥上的過濾白頭，通常判斷的標準是純水以5mL/min流速清洗的時候，如果壓力超過1MPa則考慮更換。根據(jù)更換下來的過濾白頭，可以大致判斷儀器的使用狀況。如果白頭是白色的且不臟，但是堵，那有可能是流動相中有鹽析出造成的;如果白頭是灰黑色的，這是最常見的狀況，是由于泵頭密封墊磨損造成的；如果白頭是黃色、綠色等怪異的顏色，儀器污染較嚴重，可能是流動相里的微生物造成的。
除此之外，在泵的使用過程中，常常會遇到更換流動相的情況，這種更換是指從反相溶劑更換到正相溶劑或者反過來的過程。這個過程要考慮流動相的兼容性，常用的正反相色譜溶劑是不互溶的，所以在更換期間，一定要用異丙醇徹底沖洗系統(tǒng)，保證管路里所有的原有溶劑都被異丙醇替換掉后再更換流動相。
三、進樣器的保養(yǎng)
進樣器分手動和自動兩大類，雖然兩者工作模式不同，但使用的要點是基本一致的。
1.防止交叉污染
自動進樣器最常見的問題是交叉污染，交叉污染產(chǎn)生的原因很直接，樣品殘留在進樣針內(nèi)外表面，并隨下一次進樣進入色譜系統(tǒng)。要解決交叉污染，主要靠清洗。自動進樣器都會有洗針的功能，如果樣品濃度較高或者是吸附性比較強，一定要打開此功能；如果未打開洗針功能，污染可能已經(jīng)殘留在了針座或流通閥上，那么這兩個部件需及時超聲清洗。
出現(xiàn)在自動進樣器上的另外一個問題是峰面積重現(xiàn)性差，考慮可能與自動進樣器吸取樣品有關。首先觀察樣品的液面是不是足夠高，以保證進樣器可以吸到樣品。排除這個問題后，再察看自動進樣器的設置，對于一些粘度大的樣品，要降低自動進樣器的吸取速度。
2.精細操作
手動進樣器的操作要點大致相同，應使用液相色譜儀專用平頭進樣針，進樣時插針應插到底，不使用時將針頭留在進樣器內(nèi)，使用前后都要及時清洗。
四、色譜柱的保養(yǎng)
色譜柱是化合物分離的關鍵。保養(yǎng)良好的色譜柱具有很高的塔板數(shù)，且儀器基線平穩(wěn)。色譜柱一般比較昂貴，在平時的工作中要注意以下幾個事項。
(1)色譜柱不能夠碰撞、彎曲或強烈振蕩。安裝時要保證閥件或管路的清潔。
(2)流動相在使用前必須進行脫氣處理，盡量不使用或少使用高粘度的流動相。
(3)在滿足靈敏度的情況下，盡可能使用小進樣量。如果樣品比較“臟”，要進行凈化或提純處理。
(4)分析結束后，要清洗進樣閥中殘留的樣品，并用流動相或適當?shù)娜軇┣逑瓷V柱。
(5)如色譜柱長期不用，應該用適當?shù)挠袡C溶劑保存并封閉或定期給柱子補充合適的流動相。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中，正相柱可以存放于嚴格脫水后的純正己烷中，離子交換柱可以儲存于水中。
液相色譜儀的維護及保養(yǎng)
五、檢測器的保養(yǎng)
目前市場上檢測器的種類繁多，而且各有特性。以最常用的紫外(VWD)/二極管陣列(DAD)檢測器來說，這兩類都是紫外類的檢測器，雖然光路設計不同，但是本質(zhì)原理都是相同的。
1.光源部分
檢測器中非常重要的部件是光源，光源對發(fā)射能量有要求，一旦能量衰減到一定程度，就會出現(xiàn)基線噪聲變大，靈敏度降低等一系列影響使用的問題，因此光源是一個消耗品。通常紫外燈的壽命是2000h，當?shù)竭_這個時限的時候，我們就要特別關注燈的能量狀況，可以通過儀器維護軟件中自帶的“燈能量測試”功能來判斷，測試的結果會分別評估低、中、高三個波長段的能量，一旦某個波長段的測試結果顯示失敗，就表示需要更換燈。
2.檢測池
檢測器中另一個重要部件是檢測池，也叫流通池。通常大家最關心的一個問題是檢測池被堵掉，因為檢測池通常不是很耐壓，所以一旦被堵就很可能造成損壞。事實上檢測池通常不太容易被堵，原因是幾乎所有的顆粒雜質(zhì)都會被色譜柱攔下了，所以堵塞檢測器的東西基本都不是來自樣品的，很可能是后來“產(chǎn)生”的，比如含鹽流動相殘留在檢測池中導致鹽析出。
六、廢液的處置
液相色譜儀的廢液大部分含有有機溶劑，會對人體產(chǎn)生一定的危害，對環(huán)境也會產(chǎn)生污染，嚴禁隨意傾倒，應及時處理。目前，國內(nèi)大部分實驗室是將廢液送到專門的廢液處理站集中進行無害化處理。
七、結論
液相色譜儀是測量儀器中的一種利用混合物在液-固或互不相溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離后分析鑒定的儀器，應用于生物化學、生物醫(yī)學、環(huán)境化學、石油化工等部門。液相色譜儀是一種高精密儀器，在日常使用中的維護保養(yǎng)工作細致謹慎，需要每一位使用者在實踐中不斷地摸索。
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